期刊简介
本杂志是由中华人民共和国卫生主管，同济医科大学附属协和医院主办，国内外公开发行的学术性期刊，1996年被评为全国优秀期刊。辟有专家论坛、临床研究、实验研究、技术与方法、研究报告、综述、进修苑、学术争鸣、经验介绍及病例报告等多个栏目。
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首页>临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
- 杂志名称：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 国际刊号：1001-1781
- 国内刊号：42-1764/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：第二届国家期刊奖提名奖期刊收录：万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
人糖皮质激素受体β与绿色荧光蛋白融合基因共表达慢病毒载体的构建
王明明；时鹏；宋玉杰；李亚伟；王海波
关键词：糖皮质激素受体β, 绿色荧光蛋白, 慢病毒载体, 转染
摘要：目的:构建人糖皮质激素受体(GR)β与绿色荧光蛋白(GFP)共表达的慢病毒载体.方法:采用基因重组技术从人胚脑表达文库内获得人GRβ cDNA,双酶切法将目的片段克隆人pGC-LV载体中,获得重组载体pGC-FU-GRβ.测序正确的质粒pGC-FU-GRβ通过脂质体Lipofectamine 2000转染293T细胞.通过荧光检测和Western Blot检测鉴定慢病毒表达载体质粒.与辅助包装质粒转染293T细胞,包装后产生病毒液,Real-time PCR法测定其滴度.结果:成功构建人GRβ-GFP重组慢病毒表达载体,转染293T细胞后,荧光显微镜下可见大量绿色荧光,Western Blot检测到GRβ-GFP融合蛋白的表达.Real-time PCR测定病毒滴度为2.00E+8 TU/ml.结论:成功构建了人GRβ与GFP基因共表达的慢病毒表达载体,为探讨以激素为首选药物的慢性鼻-鼻窦炎等疾病治疗中GRβ与激素治疗敏感及抵抗的关系,提供了稳定的感染细胞载体.
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