期刊简介
本杂志是由中华人民共和国卫生主管，同济医科大学附属协和医院主办，国内外公开发行的学术性期刊，1996年被评为全国优秀期刊。辟有专家论坛、临床研究、实验研究、技术与方法、研究报告、综述、进修苑、学术争鸣、经验介绍及病例报告等多个栏目。
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首页>临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
- 杂志名称：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 国际刊号：1001-1781
- 国内刊号：42-1764/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：第二届国家期刊奖提名奖期刊收录：万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9转染大鼠耳蜗组织的体外研究
郑国玺；祝康；韦俊荣；许珉；杨广笑；王全颖
关键词：重组腺相关病毒, 活性依赖性神经营养因子9, 耳蜗毛细胞, 逆转录-聚合酶链反应
摘要：目的:包装携载神经营养素(NT4)与活性依赖性神经营养因子-9(ADNF-9)融合基因的重组腺相关病毒rAAV-NT4-ADNF-9,并观察该重组病毒对体外培养的耳蜗组织的转染.方法:使用pSSHG-CMV-NT4-ADNF-9、pFG140和pAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备ADNF-9重组腺相关病毒(AAV),应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度;体外分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞;将重组病毒感染体外培养的新生SD大鼠耳蜗毛细胞,于24 h后提取组织行RT-PCR以检测rAAv-NT4-ADNF-9对耳蜗的转染.结果:应用斑点杂交实验检测重组病毒滴度为2×1016 cfu/L,表明成功构建了重组AAV载体.成功分离培养新生SD大鼠的耳蜗毛细胞后,经RT-PCR反应,琼脂糖凝胶电泳检测结果显示NT4-ADNF-9在耳蜗组织中得到表达.结论:构建的重组病毒rAAV-NT4-ADNF-9在体外可成功转染耳蜗组织,用于基因治疗的研究.
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