期刊简介
本杂志是由中华人民共和国卫生主管，同济医科大学附属协和医院主办，国内外公开发行的学术性期刊，1996年被评为全国优秀期刊。辟有专家论坛、临床研究、实验研究、技术与方法、研究报告、综述、进修苑、学术争鸣、经验介绍及病例报告等多个栏目。
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首页>临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
- 杂志名称：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志
- 主管单位：中华人民共和国教育部
- 主办单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院
- 国际刊号：1001-1781
- 国内刊号：42-1764/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：第二届国家期刊奖提名奖期刊收录：万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
酶消化分离法原代培养人鼻黏膜上皮细胞的改进
杨继红；张革化；魏燕；李源
关键词：鼻黏膜, 上皮, 细胞培养
摘要：目的:探讨酶消化分离法原代培养人鼻黏膜上皮细胞的实验步骤和技术要点,以提高原代培养成功率,为后续实验提供良好的培养模型.方法:在酶消化分离细胞、无血清培养法的基础上,对取材处理、消化酶应用等步骤进行改进,如翻揭分离获取黏膜层、消化中加入Ⅰ型DNA酶(DNase type Ⅰ)、胶原酶消化后含黏膜块的溶液中直接加入胰蛋白酶,以及应用不包被的培养皿培养等.原代培养的鼻黏膜上皮细胞经免疫荧光染色细胞角蛋白(CK)8/18进行鉴定.结果:鼻黏膜原代培养细胞生长良好,6～8 d汇合可用于后续实验.CK8/18免疫荧光染色阳性鉴定为上皮源性细胞.结论:酶消化分离细胞、无血清培养法可成功建立人鼻黏膜上皮细胞原代培养模型,对取材处理、酶消化等步骤进行上述改进,可提高原代培养成功率,并获得一定数量级,以及纯度较高和可靠的原代上皮细胞.
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